小鼠原代細(xì)胞形態(tài)觀察及分析研究
更新時(shí)間:2021-05-17瀏覽:713次
小鼠原代細(xì)胞中的呼吸道上皮細(xì)胞系大多來(lái)源于腫瘤組織或成系時(shí)與腫瘤細(xì)胞融合,其生物學(xué)行為與正常呼吸道上皮細(xì)胞差異較大。為更準(zhǔn)確反映呼吸道疾病條件下該類細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng),對(duì)小鼠呼吸道上皮細(xì)胞分離的新技術(shù)和培養(yǎng)方法進(jìn)行了探索。利用鏈霉蛋白酶消化法分離獲得小鼠呼吸道上皮細(xì)胞,利用特殊的*培養(yǎng)基和I型膠原包被的培養(yǎng)皿進(jìn)行原代培養(yǎng)。
鏡下可觀察到呼吸道上皮細(xì)胞的纖毛節(jié)律性的定向擺動(dòng),細(xì)胞較完整地保留了其原有生理功能。分離技術(shù)和培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、有效、可靠,為研究呼吸道疾病的細(xì)胞模型創(chuàng)造了條件。同時(shí),此法可為其它實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呼吸道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)提供借鑒。
小鼠原代細(xì)胞形態(tài)觀察:原代組織塊培養(yǎng)一般3d后組織塊周圍有生長(zhǎng)暈出現(xiàn),且逐漸向周圍擴(kuò)展,單層細(xì)胞3d后已貼壁生長(zhǎng)。結(jié)果:光鏡下可見(jiàn)培養(yǎng)的肝細(xì)胞呈三角形、圓形、類圓形或扁平不規(guī)則多角形,排列整齊,細(xì)胞界限清晰,胞漿豐富透亮,細(xì)胞中有核,有單核、雙核,呈圓形或橢圓形,核仁清晰。細(xì)胞緊密相連成單層膜,細(xì)胞增殖數(shù)量增多時(shí),整塊上皮膜隨之移動(dòng),處于上皮膜邊緣的細(xì)胞多與膜相連,很少脫火焰狀或旋渦狀走行,胞質(zhì)向外伸出2-3個(gè)長(zhǎng)短不同的突起。
小鼠原代細(xì)胞是指來(lái)源活體組織,經(jīng)特定分離方法制備而成的初始細(xì)胞。原代細(xì)胞離體時(shí)間短且不經(jīng)過(guò)永生化過(guò)程,其生物學(xué)特性未發(fā)生很大變化,仍保持原有的遺傳特征,可更好地反映細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)狀態(tài),從而獲得與體內(nèi)生理功能更接近的數(shù)據(jù)。