Jurkat細(xì)胞是一類來自人類白細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)T細(xì)胞系的細(xì)胞。它們可用于研究T細(xì)胞發(fā)育和功能。能夠進(jìn)行正常細(xì)胞循環(huán),能夠穩(wěn)定生長,容易進(jìn)行體外培養(yǎng),已經(jīng)成為了廣泛應(yīng)用的細(xì)胞系。在病毒學(xué)、免疫學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等方面的研究中有重要的應(yīng)用,例如在研究病毒復(fù)制、干擾素反應(yīng)及細(xì)胞因子等關(guān)鍵生物過程的時(shí)候。
以下是Jurkat細(xì)胞的培養(yǎng)步驟:
1.從凍存細(xì)胞庫中取出并解除凍存液,通過離心和洗滌將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到無菌的培養(yǎng)皿中。
2.將細(xì)胞培養(yǎng)在含有10-20%的胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中。細(xì)胞密度要控制在1-2×10^6細(xì)胞/mL。每2-3天更換一次培養(yǎng)基。
3.細(xì)胞密度達(dá)到80%左右時(shí)進(jìn)行細(xì)胞分離和傳代。使用無菌Trypsin-EDTA將細(xì)胞從培養(yǎng)皿中洗脫下來,制備單細(xì)胞懸浮液,再用等體積的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞懸浮液調(diào)至合適的濃度,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中繼續(xù)培養(yǎng)。
4.如果需要進(jìn)行長期保藏,可以使用液氮冷凍。將細(xì)胞用10%DMSO/90%FBS混合液凍存,置于液氮中保存,可以長期保存。解凍時(shí)用熱水浴快速回溫到37°C,再將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中。
5.在培養(yǎng)過程中,注意細(xì)胞的純度和活性。定期進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)的觀察和細(xì)胞活力、增殖能力的檢測(cè)。
Jurkat細(xì)胞的主要作用:
免疫學(xué)研究:可以用于研究免疫細(xì)胞的生物學(xué)特性、分子機(jī)制和信號(hào)傳導(dǎo)途徑等。例如,研究人員可以研究T細(xì)胞受體(TCR)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制和細(xì)胞因子的作用機(jī)制等。
病毒學(xué)研究:可以用于研究病毒感染的分子機(jī)制和防治策略。例如,研究人員可以研究HIV病毒的感染機(jī)制和治療方法等。
癌癥研究:以用于研究腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性和治療方法。例如,研究人員研究白血病的發(fā)生機(jī)制和治療方法等。