大鼠原代細胞是指從機體的組織(如小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞,稱為原代細胞。一般認為,培養(yǎng)的原代的初代細胞和傳代到第十代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。在我們的科學研究過程中,每個涉及到細胞研究的研究者都會根據自己的實驗需求采用不同的細胞。根據自己的課題采用原代細胞或者細胞系,我們都知道,細胞系的培養(yǎng)相對于原代細胞來說更為的簡單和易操作,也不會擔心細胞在正常條件下會發(fā)生分化、衰老等現(xiàn)象從而影響我們實驗的可信性和重復性。
大鼠原代細胞的培養(yǎng):
1.培養(yǎng)液選擇:(根據不同的細胞類型和實驗要求進行培養(yǎng)液的選擇)常用的有LVHDMEM,F(xiàn)12DMEM,RPMI 1640。
2.細胞培養(yǎng)過程無菌操作。正常的復蘇,換液和傳代操作,將培養(yǎng)好的細胞進行相應的實驗即可。
3.細胞鑒定。有時候我們獲取的原代細胞可能會有不是自己期望的細胞在里面,或者獲取的不是我們的目標細胞。這個時候我們需要進行細胞的鑒定。細胞鑒定需要購買特定細胞的表面標志物抗體或者染色試劑進行鑒定。
大鼠原代細胞養(yǎng)好后,它可適用哪些研究呢?
原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。